- 基因服務 - 下一代测序文库

下一代测序文库

 

Bio S&T提供最高质量的cDNA可进行454测序(FLX and Titanium)和下游的其它应用。
在改进的SMART方法基础上,我们未克隆的均一化cDNA是用我们特有的,可富集全长和大小分级,高质量cDNA的提取技术来实现的。我们提供5μg扩增的未克隆的均一化的cDNA。也提供额外量的cDNA,但需以μg为单位,费用另加。大量订货可以享受更多的折扣。

提供的均一化cDNA的选项

Type of library Starting material Primers used
Full-length (eukaryotic) Eukaryotic total RNA Oligo dT (+ interspersed dG to limit homopolymer regions)
Exclusively 5’ end Eukaryotic mRNA Random primers
Exclusively 3’ end Eukaryotic mRNA Oligo dT (+ interspersed dG to limit homopolymer regions if desired)
Full-length (prokaryotic) Prokaryotic total RNA Random primers

图1:最近构建的植物均一化cDNA文库用于钛454测序(克隆的cDNA照片如下)的电泳照片

Cdna size blast

交付项目

1. 1μg扩增的未均一化的cDNA(按照要求提供)。
2. 5μg扩增的均一化的cDNA(可用于直接克隆)。
3. 扩增的引物(按照要求提供)。

相关服务

选项1:克隆的cDNA文库-需另加费用

• Bio S&T 在均一化之后测试10个克隆来鉴定插入片段的大小(将提供电泳照片)。

• 提供50,000个克隆(cDNA插入载体)并且以甘油菌保存的形式寄送。

• 另付费可以提供附加的克隆。当询问的时候请注明需要的克隆数。

选项2: 池化-在购买了选项1的基础上,需另加费用

• 克隆的细胞将分装在96孔板里(约50μL/孔)。

选项3:筛选-在购买了选项1的基础上,需另加费用

• 利用客户提供的引物,筛选50,000个克隆。提供一个阳性克隆。

选项4:样品测序-费用另付

• 随机挑取10个克隆进行测序(一个单向测序/克隆)并提供测序数据(色谱文件和文本文件)。
选项5:提供更多的未克隆的cDNA-费用另付

• 购买未克隆cDNA的价格以μg为单位

材料要求

至少1μg RNA的总量(如果材料不受限制,越多越好)。RNA须用专业推荐的标准方法提取(强烈推荐TRIZOL法)。如果材料有限,请联系我们,我们可以提供RNA的提取方法(一般合同签定时我们会自动提供)以避免因方法使用不当而造成的不必要的材料损失。提供组织或者细胞也可以,但我们需要收取一定的RNA提取费用。

准备和运输

请沉淀RNA并且用80%的酒精洗涤。用80%的酒精重新悬浮沉淀。以下很重要:

  1. 用旋盖的EPPENDORF管。
  2. 用80%的酒精将管子几乎装满。
  3. 用石蜡膜(parafilm)将管盖封好以防蒸发。.石蜡膜(parafilm)将管盖封好以防蒸发。

我们推荐使用干冰运输,但如果您不方便用干冰运输的话,也可请将材料室温寄至:

Bio S&T Inc.
6362 Trans Canadienne
St. Laurent
Quebec, Canada
H4T 1X4
Tel: (514) 731-4706


我们接受从世界任何地方寄来的样品,也能接受干冰运输。在干冰运送方面,我们有着在全世界运输的丰富经验。