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pESAC13载体

Bio S&T是全球独家拥有pESAC13载体使用权,能构建pESAC13 PAC文库的运营商。这种特殊的载体(由NAICONS提供的独家经营权)能用于构建链霉菌(Streptomyces sp.)和放线菌(Actinomycete sp.)等其它微生物的DNA文库。这样的文库可以被用来筛选那些含有所需的生物合成途径基因簇的阳性克隆。

ESAC (E. coli-Streptomyces Artificial Chromosome) 的人造染色体载体不仅可以自主地复制,穿梭生长在大肠杆菌和链霉菌之间,还能以位点位亲和性的特点特异性的整合到链霉菌的基因组里。

pESAC13是pPAC-S1的衍生物,是最初开发的非共轭ESAC之一 (Sosio et al., 2000)。它是通过将来自RK2复制子(Simon et al., 1983)的oriT的760bp DNA片段插入在pPAC-S1(M. Sosio et al., unpublished)的BstXI独特位点而构建成的。

pESAC13的重要优点是文库可以从大肠杆菌共轭转移到多个链霉菌种类以及几种非链霉菌放线菌中,而不需要将大片段的克隆纯化,再通过原生质体介导的转化或其它方式引入寄主细胞内。

图 1: pESAC载体图谱

pESAC vector map

服务亮点

  1. 我们保证覆盖率,
  2. 高大片段率和片段的均匀分布,
  3. 用我们的设施自行提取大片段(HMW )的DNA,
  4. 有操作植物,真菌,细菌和动物文库的丰富经验,
  5. 特别具有操作富含GC的生物体和海洋微生物的经验,
  6. 阵列的BAC文库以条形码标记的微孔板来装载,
  7. 我们有在全球范围内有广泛快递的经验,
  8. 我们提供可靠的售后技术支持,
  9. PAC文库是客户的财产,绝不在内部使用,销售或分发,
  10. 我们提供相关的参考文献。

 

表 1: 过去建立的数个PAC库具DNA的平均片段

Starting material Average Insert size
Streptomyces sp. 130 Kb
Streptomyces sp. 145 Kb
Streptomyces sp. 125 Kb
Actinomycete sp. 155 Kb
Streptomyces sp. 139 Kb

 

图 2:DraI消化后PFG电泳结果显示平均插入片段大小为155Kb的PAC克隆(放线菌)

Insect clones